水果蔬菜中農(nóng)藥殘留問(wèn)題十分嚴(yán)峻，已引起人們廣泛關(guān)注與重視，同時(shí)，果蔬汁飲料的質(zhì)量和安全勢(shì)必受到威脅。五氯硝基苯屬有機(jī)氮保護(hù)性殺菌劑，主要用于土壤和種子處理，對(duì)多種蔬菜的苗期病害及土壤傳染的病害有較好的防治效果，其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難以降解，殘留期長(zhǎng)，具有高毒性和生物蓄積性，對(duì)生物體內(nèi)分泌系統(tǒng)有干擾。標(biāo)準(zhǔn)GB 2673-2012規(guī)定果蔬中五氯硝基苯最大殘留限量≤0.1 mg/kg。2，4，6-三氯酚作為一種防腐劑、殺菌劑，被眾多國(guó)家定為環(huán)境中優(yōu)先控制污染物，氯酚類化合物對(duì)人類健康和環(huán)境產(chǎn)生危害。
1色譜條件
色譜柱：ATTM-PESTICIDE，內(nèi)徑0.25 μm，30 m×0.25 mm，Alltech；柱溫130℃；1075分流/不分流注樣器，不分流進(jìn)樣，分流閥關(guān)閉時(shí)間為0.5 min；進(jìn)樣量1 μL；進(jìn)樣器溫度300℃；ECD檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度300℃；載氣為高純氮?dú)?；柱前?.21 MPa，流量1.5 mL/min。
2樣品處理
將混合果蔬汁樣品過(guò)孔徑0.45 μm微孔濾膜，取5 mL置于具塞尖底離心試管中，注入1.5 mL混合萃取劑（甲醇與甲苯體積比為4∶1），樣品與萃取劑混合形成乳濁液，靜置2 min，在2 500 r/min轉(zhuǎn)速下離心2 min。用10 mL注射器將下層樣品吸出棄去，上層甲苯相析出量為260 μL，取1 μL進(jìn)樣分析。
3色譜條件優(yōu)化
考察了程序升溫及各種恒溫條件下2，4，6-三氯酚、五氯苯甲醚和五氯硝基苯的分離情況，發(fā)現(xiàn)柱溫恒溫130℃時(shí)3組分的分離和響應(yīng)值情況最好，最終確定柱溫為恒溫130℃。
4萃取條件優(yōu)化
4.1 萃取劑的選擇
對(duì)萃取劑要求是：密度最好比水大，便于操作；在水中溶解度很??；對(duì)分析物有良好的萃取能力；與所用檢測(cè)器相適應(yīng)，雜峰干擾小。
首先，常見(jiàn)的密度比水大的二氯甲烷、三氯甲烷等溶劑不能用于電子捕獲檢測(cè)器?？疾炝硕蚧肌⒓妆胶投妆阶鳛檩腿┑那闆r。結(jié)果表明，二硫化碳作為萃取劑時(shí)，萃取不出2，4，6-三氯酚，萃取效率低；二甲苯作萃取劑萃取效率高但對(duì)組分有干擾；甲苯作萃取劑時(shí)無(wú)雜質(zhì)峰干擾，萃取效率高，故選擇甲苯作萃取劑。
4.2 分散劑
考察了甲醇、丙酮、乙腈3種有機(jī)溶劑作分散劑的分散萃取情況，試驗(yàn)結(jié)果表明，丙酮和乙腈作為分散劑萃取效率低；甲醇無(wú)雜質(zhì)峰干擾，萃取效率高，所以用甲醇作為分散劑。
4.3 萃取劑體積
試驗(yàn)考察了100 μL～600 μL的萃取劑對(duì)回收率的影響，保持甲醇體積為1.2 mL，甲苯的體積為300 μL時(shí)，3種組分的萃取效果最佳。
4.4 樣品pH值
在一定pH范圍內(nèi)，調(diào)節(jié)樣品酸度有利于提高萃取效率。考察了樣品pH對(duì)回收率的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)pH＜3時(shí)，回收率會(huì)降低；當(dāng)pH＞3時(shí)，隨著pH的增加，回收率基本不變，而實(shí)際樣品pH值為3.6，故無(wú)需再調(diào)節(jié)酸度。
4.5 鹽析效應(yīng)
試驗(yàn)考察了600 mg～1 000 mg的氯化鈉含量對(duì)萃取率的影響。結(jié)果表明，加鹽與否對(duì)萃取效率影響甚微，所以試驗(yàn)選擇不加鹽。
5 線性方程和檢出限
用甲醇對(duì)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備混合液分級(jí)稀釋，配成系列質(zhì)量濃度的工作溶液后，在所選的色譜條件下，以y（峰面積）對(duì)x（質(zhì)量濃度）繪制工作曲線，3種組分在5.0 mg/L～100.0 mg/L范圍內(nèi)線性良好。
以甲苯為萃取劑，甲醇為分散劑，分散液液微萃取果蔬汁中2，4，6-三氯酚、五氯苯甲醚、五氯硝基苯3種含氯殺菌劑，毛細(xì)管氣相色譜分離/電子捕獲檢測(cè)器測(cè)定。試驗(yàn)主要考察了分散劑、萃取劑、鹽效應(yīng)及酸度對(duì)目標(biāo)化合物萃取的影響情況。結(jié)果表明，在5.0 μg/mL～100.0 μg/mL范圍內(nèi)3種組分有良好線性，相關(guān)系數(shù)大于0.999 3，平均回收率分別為95.3%、96.5%、81.5%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.53%、6.37%、5.94%。
采用分散液液微萃取-氣相色譜法測(cè)定果蔬汁中的含氯殺菌劑，樣品處理方法操作簡(jiǎn)便，快速高效，所用試劑少，是一種對(duì)環(huán)境友好，操作簡(jiǎn)便的分析方法，適合果蔬汁飲料中該類化合物的測(cè)定。
